01SB

Identification and Islotion of LCIA gen from C.Reinharditti and coloning in PBI121 binary vactor and transform to Agrobacterium

كارشناسي ارشد

بيوتكنولوژي كشاورزي

پيام نور مركز اصفهان

1391

1397

46

دكتر يوسفي فر

دكتر كوهي

دي اكسيد كربن موجود در اتمسفر يكي از مواد اوليه ضروري در رشد و نمو گياهان است. اين گاز مي¬تواند تحت تأثير فاكتورهاي متعدد توليد شود و موجبات خسران فراواني را براي اكوسيستم و سكنه آن باعث شود. افزايش جذب دي اكسيد كربن در گياهان ميتواند به عنوان مدل جديدي از امنيت محيط زيست مطرح شود كه ضمن كاهش دي اكسيد كربن هوا بتواند به نوعي باعث افزايش بيوماس گياه شود. در اين تحقيق سعي بر آن است كه ضمن شناسايي ژن LCIA كه در فرايند افزايش جذب HCO3- در جلبك¬ها فعال مي¬باشد بتوان در آينده زمينه انتقال آن را به گياهان C3 فراهم و ميزان جذب CO2 را در اين گياهان افزايش داد. ضمن كاشت جلبك كلاميدوموناس در محيط‌هاي كشت مختلف DNAجلبك استخراج و پس از استاندارد سازي پرايمر ژنLCIA شناسايي و تكثير گردد. سپس در ادامه RNA استخراج و پروسه ساخت cDNA انجام و ژن LCIA تكثير و توليد مي¬گردد و سپس قطعه 1011جفت بازي حاصل از واكنش زنجيره اي پليمراز برروي ژل آگارز شناسايي شد وسپس در ناقل بياني دوتايي PBI121 همسانه سازي شد پلاسميد نوتركيب بدست آمده به روش شوك حرارتي به باكتري E.coli سويه منتقل شد و كلوني‌ها روي محيط گزينش گر كانامايسين 100 ميكروگرم در ميلي ليتر رشد كردند با استفاده از تكنيك كلوني PCR و هضم آنزيمي صحت همسانه سازي تاييد گرديد سپس اين سازه به روش شوك حرارتي به باكتري Agrobactrerium tumafaciance سويه LBA4404 منتقل شد و حضور آن در باكتري توسط كلوني PCR تاييد گرديد

65895