01PHD

investigation of antifungol activity of phycocyaniin extracted from spirulina platensis against candida albicance abd effect of related cream on mice infectd by candida albicance

دكتري

بيوشيمي

پيام نور مركز اصفهان

1398

1398

137

دكتر محمد فضيلتي،دكتر حسين فضيلتي

دكتر مهرانا كوهي

اسپيرولينا پلاتنسيس، يك جلبك سبزآبي تك¬سلولي است كه داراي ويتامين، مواد معدني، رنگدانه¬ها، پروتئين¬ها و پلي¬ساكاريدها مي¬باشد و در محصولات آرايشي، براي حفاظت از پوست، مورد استفاده قرار مي¬گيرد. مطالعات اوليه، فعاليت ضدقارچي، آنتي¬اكسيداني و مزيت¬هاي بسيار زياد عصاره اسپيرولينا و رنگدانه¬هاي فيكوبيلين اين جلبك برروي سازگاري پوست، را نشان مي¬دهد. بطور كلي، رنگدانه¬هاي فيكوبيلين اسپيرولينا، خاصيت فلورسانسي زيادي دارند و در آب، محلول هستند. اين رنگدانه¬ها، به سه طبقه، دسته¬بندي مي¬شوند: رنگدانه¬ها با انرژي بالا (فيكواريترين¬ها)، رنگدانه¬ها با انرژي متوسط (فيكوسيانين¬ها) و رنگدانه¬ها با انرژي كم (آلوفيكوسيانين). مشخص مي¬شود كه در بين اين رنگدانه¬ها، فيكوسيانين بعلت دارا بودن ويژ¬گي¬هاي دارويي زياد و كاربردهاي زيادش در صنايع غذايي، بهترين نوع است. از طرف ديگر، اين رنگدانه، ويژگي¬هاي آنتي¬اكسيداني و ضدقارچي طبيعي فوق¬العاده¬اي دارد. بنابراين، در تحقيق حاضر، فيكوسيانين با روش سونيكاسيون و سانتريفوژ از اسپيرولينا پلاتنسيس استخراج شد و توسط رسوب آمونيوم¬سولفات و روش دياليز، خالص¬سازي گرديد. سپس، ميزان خلوص فيكوسيانين، 66/2 و 26/1 بدست آمد و غلظت اين رنگدانه نيز 29/0 ميلي¬گرم بر ميلي¬ليتر محاسبه شد. بعد از آن، فيكوسيانين خالص¬سازي¬شده، توسط روش جذب UV اسپكتروفتومتر، FT-IR و روش كروماتوگرافي مايع با فشار بالا (HPLC)، مورد آزمايش قرار گرفت. در روش UVاسپكتروفتومتر، پيك¬هاي وسيعي در طول موج¬هاي 280، 620 و 652 نانومتر ايجاد شدند. همچنين، ساختار و پيوندهاي مولكولي فيكوسيانين، توسط روش FT-IR، مشخص گرديد. علاوه بر اين، فعاليت ضدقارچي غلظت¬هاي مختلف فيكوسيانين خالص¬سازي¬شده، درمقابل قارچ كانديدا آلبيكنس برروي پليت¬هاي سابارود دكستروز آگار تحت شرايط استريل، بررسي شد. نتايج، نشان دادند كه قطر هاله عدم رشد در غلظت¬هاي 20 و 25 ميلي¬گرم بر ميلي¬ليتر فيكوسيانين، بيش¬ترين ميزان است كه اين موضوع، نشاندهنده اين است كه فعاليتآنتي¬كانديدايي فيكوسيانين در اين غلظت¬ها، حداكثر مي¬باشد. بطور كلي، فعاليت ضدقارچي فيكوسيانين، با افزايش غلظت فيكوسيانين، بطور معني¬داري (05/0p<) افزايش يافت. بعد از اينكه به اثبات رسيد كه فيكوسيانين در غلظت¬هاي 20 و 25 ميلي¬گرم بر ميلي¬ليتر بيش¬ترين فعاليت ضدقارچي را دارد، پمادي از اين غلظت¬ها ساخته شد و اثر آن پماد برروي موش¬هاي آلوده به قارچ كانديدا آلبيكنس، مورد بررسي قرار گرفت. درواقع، پماد¬هاي 0%، 5/1% و 3% حاوي فيكوسانين با غلظت 20 ميلي¬گرم بر ميلي¬ليتر، به¬مدت 14 روز، روزي يك بار، برروي سه گروه موش آلوده به كانديدا آلبيكنس (هر گروه شامل 5 موش بودند)، ، تجويز شد. در اين مطالعه، به اين نتيجه رسيديم كه گروه¬هايي كه با كرم¬هاي 5/1% و 3% تيمار شدند، زودتر از گروه كنترل، بهبودي پيدا كردند كه اين افزايش بهبودي، معني¬دار (05/0p<)بود.

65420