۲۶۹۳پ

Isolation and identification of morphological - molecular microalgae from coast of golestan province and East of mazandaran province using PCR and protein measurement

كارشناسي ارشد

بيوتكنولوژي ميكروبي

دانشگاه پيام نور تهران شرق

۱۳۹۴

۱۳۹۴/۱۱/۲۵

۱۴۰ص.

نوروزي ، مصطفي - آموزگار ، محمدعلي

بخشي خانيكي ، غلامرضا

۱۱۳-۱۱۹

Microalgae, Golestan, mazandaran, protein

ريز جلبك ها يك گروه متنوع از ميكروارگانيسم هاي فتوسينتتيك هستند كه به طور گسترده اي در اكوسيستم هاي آبي و زميني جهاني توزيع شده اند. به منظور سنجش پروتئين ريزجلبك ها ، نمونه برداري در 2 فصل سال (زمستان و تابستان ) از سواحل استان گلستان و شرق مازندران صورت گرفت. از اين نمونه جهت جداسازي گونه هاي مختلف ريزجلبك، سري رقت هاي متوالي در محيط كشت F2 سترون تهيه شد . سپس از رقت هاي تهيه شده، كشت در محيط كشت هاي BB,BG,F2 به صورت خطي سه مرحله اي صورت گرفت. كشت خطي روي پليت آگار جهت ايزوله كردن و جداسازي و خالص سازي كلني هاي تك صورت گرفت ودر اين محيط كشت ها از آنتي بيوتيك ايمي پنم جهت خالص سازي ريزجلبك يوكاريوتي و تك سلولي و آنتي بيوتيك سيكلوهگزاميد جهت حذف آلودگي قارچي و خالص سازي نمونه هاي سيانوباكتر به كاربرده شد. به منظور خالص سازي سويه ها، پس از رشد و ظاهر شدن كلني هر يك، حتي المقدور از تك كلني ها كشت خالص به عمل آمد. در اين نمونه برداري 16 گونه از مناطق مختلف جداسازي شدند. مشاهدات ميكروسكوپي وتاييد شكل مرفولوژيكي با استفاده ازكتاب هاي كليد شناسايي صورت گرفت و سپس براي شناسايي بيشتر با روش تعيين ترادف ژن18S rRNA آناليز شدند. به اين منظور پس از تهيه توده زيستي سويه ها، DNA ژنومي سلول ها استخراج شده و تكثير ژن به كمك دو پرايمر SSU1 و ITS1DR تحت واكنش زنجيره اي پليمراز انجام گرفت. از جمله سويه هاي جداسازي شده مي توان به Chlamydomonas ، Desmudesmus ، Chlorella ، Chlorococcum ،Cyclindocyctis ، Scenedesmus و Morphridium اشاره كرد. در اين تحقيق سنجش پروتئين نمونه ها با استفاده از روش Bradford و استخراج پروتئين از سلول ها طي روش هاي متفاوت فيزيكي و شيميايي صورت گرفت. روش فيزيكي مورد استفاده Sonication و روش شيميايي خود شامل دو روش متفاوت TCA و Tris-Hcl بود كه در نهايت نتايج بصورت بازده ( Yield) گزارش شدند.

۱۳۹۷/۷/۱

47973