1973پ

Development of Pseudomonas aeruginosa quorum sensing inhibitor to prevent biofilm formation an​d in vitro eva​luation of their efficacy

كارشناسي ارشد

زيست شناسي(بيوشيمي)

دانشگاه پيام نور مشهد

1394

81ص.

فضلي بزاز ، بي بي صديقه - رامشيني ، حسن

هادي زاده ، فرزين

76-79

Biofilms, NSAID, Pseudomonas aeruginosa, Quorum sensing, Tobramycin

در پايان نامه حاضر به داروهاي ضد التهاب غير استروئيدي (NSAIDs) كه پيش تر به خاطر خواص كاهش دهنده ي درد، تب و التهاب كاربرد داشته اند، از نگاهي ديگر توجه شد. هدف از اين مطالعه، ارائه يك روش آسان و كم هزينه براي مقابله با بيوفيلم هاي باكتريPseudomonas aeruginosa، با بهره گرفتن از NSAIDs براي شكستن مقاومت باكتري به آنتي بيوتيك توبرامايسين مي باشد. ابتدا با روش هاي داكينگ و سپس توسط آزمون هاي آزمايشگاهي از تشكيل بيوفيلم توسط باكتري Pseudomonas aeruginosa سويه PAO1 (Wild type, Nottingham) جلوگيري شد. پس از انجام مدل سازي مولكولي، از NSAIDs در كنار آنتي بيوتيك توبرامايسين (با توجه به اين كه Pseudomonas aeruginosa در برابر بيشتر آنتي بيوتيك هاي معمول مقاومت مي كند، اما برخي گونه هاي آن به توبرامايسين پاسخ مي دهد، به همين دليل از آنتي بيوتيك توبرامايسين در اين پروژه استفاده شد) در برابر باكتري ياد شده، استفاده شد. براي اين منظور جذب محلول كريستال ويوله در اتانول كه معياري از تشكيل بيوفيلم هايPseudomonas aeruginosa مي باشد، توسط دستگاه Plate Reader خوانده شد. همچنين ميزان نفوذ ماده داروئي (NSAIDs) در بيوفيلم ها، توسط نمك تترازوليوم اندازه گيري و جذب آن نيز توسط دستگاه Plate Reader اندازه گيري شد. پس از انجام داكينگ، بهترين كونفورماسيون هر كدام از NSAIDs را براي مهار پروتئين هاي LasR و PqsE را بر اساس نتايج انتخاب كرديم. به عبارت ديگر با توجه به اينكه انجام كار روي مهاركننده دوگانه بود، توانستيم به شكلي دست پيدا كنيم، كه ثابت مهار هم براي LasR و هم PqsE در پائين ترين حالت قرار گيرد. و پس از آناليز كمي بيوفيلم هايPseudomonas aeruginosa در مجاورت NSAIDs و به كمك آنتي بيوتيك توبرامايسين و اندازه گيري جذب كريستال ويوله موجود در محلول اتانول به عنوان معياري از ميزان بيوفيلم تشكيل شده، مشخص گرديد، كه تشكيل بيوفيلم هاي Pseudomonas aeruginosa در مجاورت ماده داروئي مورد استفاده (پيروكسيكام ، ملوكسيكام و كتورولاك) و به كمك آنتي بيوتيك توبرامايسين به مراتب كمتر از زماني است، كه از NSAIDs استفاده نشده بود، و در نتيجه مي توان براي درمان عفونت هاي سودوموناسي با بهره گيري از NSAIDs در كنار آنتي بيوتيك توبرامايسين، از دوز كمتري از آنتي بيوتيك استفاده نمود. در اين مطالعه و با توجه به داده هاي به دست آمده، مشخص شد، با توجه به شباهت ساختماني NSAID هايي مانند پيروكسيكام، ملوكسيكام و كتورولاك با ملكول هاي كوچك نفوذ پذير متعلق به دسته لاكتون هاي هموسرين N (AHLS) كه توسط باكتري هاي بيوفيلم به محيط پيرامون آزاد مي شوند، اين ماده هاي داروئي مي توانند، با مهار پروتئين هاي LasR و PqsE به عنوان مهاركنندگان سيستم Quorum-sensing به كار روند، و با تسهيل ورود و نفوذ توبرامايسين به داخل بيوفيلم ها و با جلوگيري از تشكيل ديواره اگزو پلي ساكاريدي آن ها مانع از تشكيل بيوفيلم و تهاجم و در نتيجه بيماريزاييPseudomonas aeruginosa گردند

1396/10/4

44344