505

Thesis Submitted in Partial Fulfillment of the requirement for the Degree of M.Sc In Chemical Engineering

كارشناسي ارشد

مهندسي شيمي

تهران شمال

1396

96/2/24

19

75ص.

نام آوري، محمد مهدي

73-66ص.

Neospora caninum , RAPD primers , Molecular assay

نئوسپورا كنينوم تك ياخته اي از شاخه اپي كمپلكسا است كه موجب بروز بيماري هاي توليد مثلي، سقط جنين،مرده زايي، ناباروري مي شود. نئوسپورا كنينوم به عنوان مهم ترين عامل عفوني بروز سقط جنين در گله هاي گاو در سراسر جهان شناخته مي شود، كه باعث خسارات بالاي به صنايع گاو داري در جهان مي شود. انتقال از طريق جفت از اصلي ترين راه هاي انتقال عفونت در گاوها مي باشد امروزه با توجه به عدم وجود داروي مناسب عليه اين بيماري، روش هاي كنترل عفونت نئوسپورا، به طرف توليد واكسن هاي مؤثر سوق يافته است. در حال حاضر بررسي هاي متنوعي بر روي تنوع ژنتيكي نئوسپورا كنينوم صورت گرفته است. اطلاعات دقيق در مورد تنوع ژنتيكي بين ايزوله هاي موجود در مناطق جغرافيايي مختلف از نئوسپورا كنينوم بسيار اندك است. با توجه به اين كه طي چند سال گذشته وريته هاي متنوعي از نئوسپورا كنينوم در آزمايشگاه ملي نئوسپورا در موسسه رازي توليد شده است، هدف از اين پژوهش بررسي تنوع ژنتيكي اين وريته ها با استفاده از روش مولكولي و پرايمر هاي مختلف است. در اين پژوهش وريته هاي Np1-Np2-Np3-Np4-Np5- Npf با وريته NC1 مورد ارزيابي قرار گرفته اند. بعد از انجام كشت سلولي و استخراج DNA تست PCR انجام گرفت. نتايج حاصله از تست هاي مختلف PCR با پرايمر هاي tand-3 ;tand-12 ;tand-13 ; tand-4 ; cont-9 cont-1 ;cont-6 cont-16; cont-14 و مولتي پلكس PCR منفي بوده ولي با روش RAPD PCR و پرايمر Ab1-12 تمامي وريته ها مثبت شده و همگي تقريبا يك الگوي يكسان را نشان داده اند بدين صورت كه الگويي كه نئوسپورا كنينوم از ژل الكتروفورز نشان داده اين وريته ها نيز به همان شكل و اندازه نشان داده اند. با توجه به اينكه اين وريته ها توانايي ايمن سازي بسيار خوبي دارند بايد پژوهش هاي بيشتري در راستاي تعيين تفاوت هاي ملكولي آنها صورت گيرد. در جمع بندي نهايي مي توان گفت اين وريته ها با توجه به تفاوت ملكولي كه از نظر پرايمر هاي ميكروستلايت نشان دادند با تمامي ايزوله هاي گزارش شده نئوسپورا كنينوم تفاوت دارند. و اين يافته همراه با توانايي ايمن سازي و غير بيماري زا بودن آنها نشان مي دهند كه اين وريته ها براي انجام تحقيقات بيشتر براي دستيابي به واكسن بسيار با ارزش هستند.

41214