782پ

Transient Experession of Green Fluorescent Protein gene in Melissa officinalis

كارشناسي ارشد

بيوتكنولوژي كشاورزي

دانشگاه پيام نور تهران شرق

1391

1391/12/23

عالي

115ص.

افقي ، حميده

بخشي خانيكي ، غلامرضا - احساني ، پرستو

91-99

Green Fluorescent Protein, Melissa officinalis, Transient expression

در چند دهه اخير گياهان به عنوان ميزباني مناسب براي پروتئين هاي نوتركيب بوده اند. گياهان بيوراكتورهاي زيستي هستند كه نسبت به فرمانتاسيون ميكروبي و كشت سلولي حيوانات داراي مزايا و كارآمدي بيشتري هستند. با كمك گياهان تراريخته ، آنتي باديها ، واكسن ها، آنزيم ها و متابوليت هاي ثانويه در طيف وسيع و ايمن تري به منظور كاربرد در حيطه هاي صنعتي و درماني توليد مي شوند. دانشمندان به منظور يافتن يك سيستم ارزان و مناسب براي توليد پروتئين هاي نوتركيب به گياهان توجه بيشتري مبذول داشته اند. كشاورزي مولكولي، بيوتكنولوژي مدرن مولكولي است كه جهت توليد تركيبات دارويي و پروتئين هاي نوتركيب در گياهان به كار برده مي شود و مي توان پروتئين ها را در مقياس بالا و با هزينه اندك در گياه توليد كرد. در اين تحقيق بيان موقت ژن GFP به روش اگرواينفيلتريشن يا انتقال ژن تحت شرايط خلاء توسط اگروباكتريوم و اگرواينجكشن با استفاده از 2 وكتور ويروسي و باكتريايي در گياه بادرنج بويه مورد بررسي قرار گرفت و ميزان بيان ژن GFP توسط اين 2 وكتور با يكديگر مقايسه شد. ژن GFP تحت كنترل پيشبرنده CaMV35s و خاتمه دهنده Nos قرار گرفت . اين ژن در وكتور بياني pCAMBIA 1304 و cr-TMV قرار داشت. هر دو پلاسميد ابتدا در باكتري coli.E تكثير شده ، سپس استخراج پلاسميد هر دو انجام شد. سپس پلاسميدهاي مورد نظر به كمك آگروباكتريوم توميفا سينس GV3101 به گياه ب منتقل شد. بيان موقت پروتئين فلورسنت در برگ هاي بادرنج بويه توسط اشعه UV مورد تاييد قرار گرفت.

1395/8/18

38557