745پ

Assessment of biochemical responses of cucumber inoculated with Rhizoctonia solani an​d expression study of PGIP an​d class 3 chitinase genes

كارشناسي ارشد

كشاورزي - بيوتكنولوژي كشاورزي

دانشگاه پيام نور كرج

1394

1394/10/23

عالي

117ص.

دهستاني كلاگر ، علي

ابراهيمي ، محمدعلي

88-98

cucumis sativus, Real-time PCR, PGIP ChitinaseIII, Defencin, Antioxidant enzymes, Rhizoctonia solani, potassium phosphite

خيار يكي از مهمترين محصولات جاليزي در ايران و بسياري از كشورها به شمار مي¬آيد. بيماري پوسيدگي ريشه و طوقه خيار كه توسط عاملRhizectonia solani ايجاد مي¬گردد. يكي از بيماريهاي شايع در گياه خيار مي¬باشد. با توجه به اثر سوء استفاده بي¬رويه از سموم مي¬توان از روشهاي جايگزين استفاده كرد كه كمترين آسيب براي محيط زيست ايجاد كند.روش¬هاي مختلفي براي كنترل بيماري وجود دارد ولي كاربرد القاء¬كننده¬ها كه مي¬تواند مقاومت را به صورت سيستميك در گياهان القاء نمايد از اهميت خاصي برخوردار مي¬باشد. علاوه بر اين خود گياهان نيز در معرض عوامل بيولوژيكي تركيبات متنوعي مثل گونه هاي اكسيژن فعال، فيتوالكسين ها و گروهي از پروتئين¬ها به نام پروتئين¬هاي مرتبط با بيماريزايي(PR) را توليد مي¬نمايد. در اين تحقيق الگوي تظاهر ژن¬هاي مرتبط با بيماريزايي كيتيناز (PR8)، ديفنسين (PR12) و PGIP و با استفاده از تكنيك Real time PCR بررسي شد و الگوي فعاليت آنزيم¬هاي آنتي اكسيدان گايوكول پراكسيداز، كاتالاز، آسكوربات پراكسيداز، سوپراكسيدديسموتاز و پراكسيدهيدروژن مورد ارزيابي قرار گرفت. گياهان بعد از سه هفته باقارچ تلقيح شده و سپس بعد، ازچهار روز با فسفيت پتاسيم4 grL-1 تيمار شدند. بيان ژنهاي مورد نظردر پنج بازه زماني و سه تكرار بررسي شد. و ميزان بيان آنها نسبت به ژن مرجع اكتين نرماليزه شد. نتايج آناليز داده¬ها نشان داد بيشترين فعاليت آنزيم¬هاي آنتي¬اكسيدان كاتالاز، آسكوربات پراكسيداز، گايوكول پراكسيداز از تيمار قارچ و فسفيت پتاسيم در بازه زماني 120 ساعت بدست آمد كه ميزان آن نسبت به گياه كنترل به ترتيب برابر(1/2، 6/17، 5/12) بود. فعاليت آنزيم سوپراكسيدديسموتاز در زمان 72 ساعت بعد تلقيح قارچ نسبت به گياه كنترل (7/1) برابر افزايش داشت. همچنين ميزان پراكسيد هيدروژن در زمان 120 ساعت بعد تيمار قارچ و فسفيت پتاسيم به ميزان (34/2) نسبت به گياه كنترل بالا رفت. بررسي تجزيه و تحليل داده¬هاي حاصل از Real-time PCR نشان داد، حداكثر بيان ژن¬هاي دفاعي، براي ژن كيتيناز در زمان 72 ساعت، براي گياهان تيمار شده با قارچ و فسفيت پتاسيم وهمچنين براي گياهان تلقيح شده با قارچ به ترتيب برابر(2 و2/2 ) و براي ژن ديفنسين در بازه 6 ساعت (8/30 و 5/145) نسبت به گياه كنترل بود. اوج بيان ژن براي PGIP در زمان 24 ساعت براي گياهان تيمار شده با قارچ و فسفيت پتاسيم 13 برابر گياه كنترل وهمچنين براي گياهان تلقيح شده با قارچ در زمان 72 ، (4/11) برابر گياه كنترل بود. به طور كلي نتايج مطالعات نشان داد فسفيت پتاسيم با افزايش فعاليت آنزيم¬هاي آنتي¬اكسيدان، وبيان ژنهاي مقاومت به بيماريزايي باعث القا مقاومت در گياهان مي¬شود. همچنين ميتوان از اين ژنهاي مقاومت براي اصلاح ژنتيكي گياهان استفاده كرد.

1395/8/9

36165