پ.م.ك.502

Investigation Of The Molecular Mechanism Of Mycoparasitism In Gamma Irradiated Mutants Of Trichodermaspp

كارشناسي ارشد

بيوتكنولوژي

مركز كرج

94

17/06/94

عالي

153ص.

شهبازي، سميرا

افشار منش، حميده

ص:150-153

پ استاد مشاور شهبازي، سميرا , پ استاد مشاور افشار منش، حميده

كيتينازها نقش كليدي در مايكوپارازيتيسم دارند زيرا در زمره آنزيم¬هاي تجزيه كننده ديواره سلولي هستند. كيتين از نظر فراواني در طبيعت دومين پليمر پس از سلولز به شمار مي¬رود كه در ساختمان ديواره سلولي قارچ¬ها نقش اصلي را داراست. علاوه بر اين كيتينازها در تشخيص از راه دور ساير ميكروارگانيسم¬هاي بيمارگر و آغاز واكنش¬هاي پارازيتي در قارچ تريكودرما در برابر ساير بيمارگرها (غير قارچي) نيز مشاركت دارند. به عنوان يكي از ارگانيسم¬ها توليد كننده انواع كيتيازها، قارچ تريكودرما به صورت يكي از ابزارهاي مهم در كنترل بيولوژيك بيماري¬هاي قارچي (از طريق مايكوپارازيتيسم) درآمده است. لذا در مطالعات مربوطه به مكانيسم مايكوپارازيتيسم، مطالعه فعاليت آنزيم كيتيناز مي تواند ابزاري مطمئن به شمار رود. در اين تحقيق، پنج گونه از قارچ تريكودرما (تريكودرما ويريد، هارزيانوم، آتروويريد، كونينجي و ويرنس) جداسازي و خالص¬سازي شدند و ميزان فعاليت مايكوپارازيتي آنها عليه پنج بيمارگر گياهي مهم (رايزكتونيا سولاني، ماكروفومينا فاسئولينا، پيتيوم آلتيموم، فوزاريوم اكسيسپروم و اسكلروتينا اسكلرتيوم) مورد بررسي قرار گرفت. بهترين گونه¬هاي كنترل بيولوژيك (تريكودرما ويريد و هارزيانوم) انتخاب و براي القاي جهش از طريق القاي جهش با پرتو گاما انتخاب شدند. براي القاء جهش در اين دو گونه قارچي منتخب، سوسپانسيون اسپور قارچ تريكودرما با دزهاي صفر تا 450 گري پرتو گاما (با فواصل 50 گري) پرتودهي شدند. دز بهينه القاي جهش، بر اساس 40-50٪ مهار رشد اسپور در محيط كشت PDA انتخاب شد و دز 250 گري به عنوان دز بهينه القاي جهش در قارچ تريكودرما محاسبه شد. داده¬هاي فنوتيپي نشان داد كه پرتودهي با اشعه گاما بر ميزان رشد ميسليومي قارچ، رنگ و شكل كلني و ميزان توليد مثل اسپور آن موثر است. همچنين ميزان فعاليت آنتاگونيستي 41 جدايه جهش يافته به همراه والد وحشي آنها در برابر كليه بيمارگرها اندازه¬گيري شد. ميزان پروتئين توليد شده و توليد آنزيم¬هاي كيتينوليتيك و فعاليت كيتينازي آن نيز كليه جدايه¬هاي جهش يافته اندازه¬گيري شد. نتايج حاصله نشان دادند كه، هم در آزمون¬هاي درون شيشه¬اي و هم در ارزيابي¬هاي گلخانه¬اي جدايه¬هاي تريكودرما قدرت ممانعت از رشد ريسه قارچ¬هاي بيمارگر را دارا هستند. در هر دو گونه تريكودرما، جدايه¬هاي جهش يافته منتخب توانايي آنتاگونيستي بالاتري نسبت به والد وحشي خود داشتند، و اين بدان معناست كه پرتوتابي با اشعه گاما راهكاري قدرتمند به منظور ارتقاي توانايي قارچ تريكودرما است.

11/07/95

كشت كار،زهرا

35102