پ.م.ك.492

Investigation of Genetic an​d Biochemical diversity of Nepeta cataria L.to identify the best of chemiotype

كارشناسي ارشد

بيوتكنولوژي

مركز كرج

94

24/06/94

عالي

117ص.

باقي زاده، امين

ابراهيمي، محمدعلي

ص:101-117

پ استاد راهنما باقي زاده، امين , پ استاد مشاور ابراهيمي، محمدعلي

به منظور بررسي تنوع ژنتيكي و بيوشيميايي گياه پونه سا يا نعناع گربه اي(Nepeta cataria L.)، 15 ژنوتيپ از چند رويشگاه مختلف جمع آوري شد. سپس اين نمونه هاي گياهي شناسايي شده، دور از نور خورشيد و در دماي اتاق خشك شدند. در آزمايشگاه با روش CTAB، استخراج DNA صورت گرفت، به منظور بررسي مولكولي از 11 آغازگر RAPD براي انجام PCR استفاده شد. پس از انجام الكتروفورز، 109 باند تشكيل شد كه در محدوده 250 تا2850 جفت باز قرار داشتند، كه از اين تعداد 109 باند، 104باند چند شكلي نشان دادند. ماتريس صفر و يك حاصل توسط نرم افزار NTSYS.pc، با استفاده از ضريب تشابه دايس و جاكارد به ماتريس فاصله تبديل شد و ضريب دايس دامنه تشابه بيشتري داشت، سپس با استفاده از الگوريتم ميانگين فاصله (UPGMA) دندروگرام مربوط رسم گرديد همچنين، تجزيه كلاستر و تجزيه به مؤلفه هاي اصلي نيز انجام شد، بر اين اساس 15 جمعيت مورد بررسي، در 4 گروه جايابي شدند. در گروه اول ژنوتيپ هاي بافق1، بافق2، بهاباد، محمد آباد مسكون، ميجان1، تفت، دلفارد1 و دلفارد2، در گروه دوم كهگيلويه1، كهگيلويه2، سقدر1، سقدر2 و سيرچ، گروه سوم فقط شامل ميجان2 و در گروه چهارم دهبكري قرار دارد. كلاستر حاصل با تنوع جغرافيايي مطابقت چنداني نداشت. تجزيه به مؤلفه هاي اصلي نيز بر روي داده هاي حاصل از RAPD انجام و پلات هاي دو بعدي و سه بعدي رسم شدند، بيشترين تغييرات را سه مؤلفه اصلي با 19/36 % كل تغييرات، توجيه كردند. گروهبندي حاصل از پلات هاي دو بعدي و سه بعدي نيز، با گروهبندي خوشه اي منطبق نبود. براي مطالعه بيوشيميايي، از 8 ژنوتيپ جمع آوري شده، با روش تقطير با آب و توسط كلونجر استخراج اسانس انجام شد، با دستگاه GC/MS تجزيه و شناسايي اجزاء اسانس صورت گرفت. نتايج GC/MSنشان داد كه در مجموع 27 تركيب در همه ژنوتيپ ها شناسايي شد، 100 % تركيبات اسانس در ژنوتيپ هاي مربوط به سيرچ، محمد آباد مسكون، سقدر2، دلفارد2 و ميجان شناسايي شد اما در ژنوتيپ هاي دهبكري، سقدر1 و دلفارد1 كه به ترتيب 8/94%، 6/96%، 8/99% تركيبات شناسايي شد. تركيب عمده اسانس در همه ژنوتيپ ها، ايزومر هاي نپتالاكتون است كه از ديگر تركيب هاي اصلي مي توان بتا كاريوفيلين، كاريوفيلين اكسايد، آلفاپينن و بتاپينن را نام برد. بر اساس نتايج حاصل از GC/MS ، داده هاي حاصل از GC/MS توسط نرم افزار SPSS آناليز شد، تجزيه كلاستر و تجزيه به عامل ها نيز انجام شد. در تجزيه كلاستر براساس تركيبات بيوشيميايي، ژنوتيپ هاي مورد نظر در 3 گروه جداگانه طبقه بندي شدند. در تجزيه به عامل ها، چهار عامل اصلي95/93% كل تغييرات را توجيه كردند.

11/07/95

كشت كار، زهرا

35046