پ.م.ك.406

Enhancement of cellulase enzyme activity in T.reesei via physical an​d chemical induced mutation methods

كارشناسي ارشد

بيوتكنولوژي

مركز كرج

92

01/04/92

عالي

167ص.

شهبازي، سميرا

عنايتي شريعت پناهي، مهران

ص:160-167

پ استاد راهنما شهبازي، سميرا , پ استاد مشاور عنايتي شريعت پناهي، مهران

كاهش پيوسته‌ي منابع سوخت فسيلي و افزايش پيوسته‌ي بهاي سوخت موجب تلاش‌هاي گسترده براي دست‌يابي به سوخت‌هاي جايگزين شده است. اگر بتوان با بهينه‌سازي هر چه بيشتر فرايندهاي توليد، از سوخت‌هاي جايگزيني مانند اتانول استفاده كرد مي‌توان اميدوار بود كه مشكل انرژي تا اندازه‌ي زيادي حل شود. براي نيل به اين هدف، موثرترين راهكار تجزيه سلولز با استفاده از كمپلكس سلولاز است.سلولز از زنجيره‌هاي بلند مولكول‌هاي گلوكز تشكيل شده كه در فرآيند هيدروليز، اين زنجيره‌ها گسسته مي‌شوند تا قند را آزاد كنند. سلولازها گستره‌ي وسيعي از كاربرد را در صنعت(توليد بيواتانول) و كشاورزي(مكمل خوراك‌دام) دارا مي‌باشند. يكي از بزرگترين مشكلات و موانع استفاده‌ي تجاري و گسترده از آنزيم سلولاز، بهاي آن است.يكي از راهكارهاي عمدهبراي كاهش بهاي آنزيم، توليد آنزيم‌هاي بهينه مي‌باشد.ميزان توليد آنزيمهاي سلولازي در قارچ تريكودرما‌ريسئي زياد بوده و براي اهداف تجاري نيز عمدتاً از آن استفاده شده است. در اين پژوهش كه با هدف افزايش فعاليت سلولاز در قارچ تريكودرما‌ريسئي با روش القاي موتاسيون شيميايي(با موتاژن‌EMS)، و فيزيكي(اشعه‌گاما و فرابنفش) صورت گرفت، ارزيابي كيفي موتانت‌هاي حاصل توسط آزمون مندلز، و القاي توليد آنزيم به‌منظور ارزيابي كمي در محيط‌هاي كشت اصلاح‌شده تريكودرما انجام شد. ميزان توليد پروتئين و فعاليت ويژه‌ي آنزيم سلولاز در همه‌ي موتانت‌ها اندازه‌گيري و پروفايل پروتئيني با ژل SDS-PAGE بررسي شد. آناليز نتايج اين آزمايشات نشان داد كه تيمار‌هاي جهش‌زايي شيميايي(EMS)، فيزيكي(اشعه‌گاما) و تلفيقي(اشعه‌گاما و‌EMS) در افزايش توليد آنزيم سلولاز در قارچ تريكودرما موفقيت‌آميز بوده و به‌ترتيب سه جدايه‌ي TR.C6، TR.M21، وDM7(21) انتخاب شد كه ميزان پروتئين و فعاليت سلولازي آنها نسبت به جدايه‌ي والدي افزايش يافته بود.

28/06/95

كشت كار، زهرا

34530