74پ

Detection and isolation of Bordetella species from pertussis suspected patients by real- time PCR assay

كارشناسي ارشد

بيوتكنولوژي (زيست فناوري) گرايش ميكروبي

دانشگاه پيام نور تهران شرق

1394

1394/11/25

عالي

98ص.

شاهچراغي ، فرشته

لامع راد ، بهزاد

86-95

Bordetella, Whooping cough, Real-time PCR

بوردتلا پرتوسيس عامل بيماري پرتوسيس يا همان سياه سرفه است كه عفونت دستگاه تنفسي بوده و در حال حاضربه عنوان بيماري بازپديد مهم در بسياري از كشور هاي دنيا به شمار مي آيد. گونه هاي مختلف بوردتلا هم باعث ايجاد علائم شبيه پرتوسيس مي شوند. به طور معمول كشت و real-time PCR با هم در تشخيص آزمايشگاهي بوردتلا پرتوسيس به كار مي روند. روش كشت اختصاصي است و ليكن علاوه بر وقت گير بودن ، حساسيت آن نيز پايين مي باشد. هدف ما در اين مطالعه تشخيص بوردتلا پرتوسيس و گونه هاي ديگر آن علاوه بر روش كشت، استفاده از روش real-time PCR مي باشد. مباني نظري و پيشينه ي تحقيق: از بهار 1393 تا بهار 1394 تعداد 501 نمونه سواب نازوفارنكس از بيماران مشكوك به سياه سرفه توسط مراكز بهداشت سراسر ايران دريافت شد. آزمايش كشت ، استخراج DNA و real-time PCR براي تمام نمونه¬ها انجام شد. براي غربالگري اوليه از سكانس¬هاي هدف IS481, IS1001, IS1002 و براي تآييد نهايي نمونه هاي مثبت از نظر بوردتلا پرتوسيس و بوردتلا هولمسي به ترتيب از سكانس هاي BP283 ، hIS1001 استفاده گرديد. اين تحقيق توسط دستگاهApplied Bio System (ABI 7500) انجام شد. يافته هاي تحقيق: از مجموع 501 نمونه مشكوك به سياه سرفه، 116 (%15/23) مورد بوردتلا پرتوسيس تشخيص داده شدند. 7 (%39/1) مورد بوردتلا پاراپرتوسيس و2 (%39/0) نمونه بوردتلا هولمسي بودند. در اين مطالعه بوردتلا برونشي سپتيكا جداسازي نشد. در روش كشت از مجموع 501 نمونه تنها 13سويه ايزوله شد كه همه بوردتلا پرتوسيس شناسايي شدند. جمع بندي و نتيجه گيري : از آنجا كه بيماري سياه سرفه از نظر مسري بودن داراي اهميت مي باشد، لذا جهت پيشگيري از شيوع آن در جامعه مي بايستي از روش هاي نوين آزمايشگاهي استفاده نمود كه در عين حالي كه در تشخيص سريع هستند، از حساسيت و اختصاصيت بالا هم برخوردار باشند. ميزان بوردتلا پرتوسيس و پاراپرتوسيس گزارش شده در اين مطالعه با گزارش هاي ساير كشورها تقريبا" مشابه بود. اما جداسازي بوردتلا هولمسي و برونشي سپتيكا كمتر از آمار منتشر شده در ساير كشورها مي باشد كه نياز به بررسي تعداد نمونه هاي بيشتري دارد. استفاده از سكانس هاي مختلف و همچنين اختصاصي در تشخيص بوردتلا پرتوسيس و گونه هاي ديگر آن ضروري مي باشد. چراكه بدين طريق مي توان اطلاعات دقيق از بروز سياه¬سرفه و كارايي واكسن موجود در جامعه به دست آورد. از آنجايي كه موارد مثبت جدا شده در كشت بسيار كمتر از ميزان موارد مثبت با روش PCR مي باشد لذا در مورد كشت بايد اطلاع رساني بيشتري به لحاظ تشخيص پزشك و طريقه صحيح نمونه گيري توسط فرد مسئول انجام شود.

1395/1/31

31484