8202

سعيده صادقزاده

كارشناسي ارشد

بيوتكنولوژي كشاورزي

پيام نور , كتابخانه مركزي دانشگاه پيام نور

1392

92ص

باغبان ، بهرام

ابراهيمي ، محمدعلي Ý كوثري نسب ، مرتضي

91-87ص

پ صادق زاده ، سعيده , ع

بيماري سلياك كه به آن آنتروپاتي گلوتن نيز گفته مي شود، به عنوان عدم تحمل گلوتن شناخته شده است .سلياك در اثر آسيب مخاط روده كوچك در پي مصرف گلوتن ايجاد مي شود و سبب اختلال در جذب مواد مغذي مي شود .افراد مبتلا به بيماري سلياك نمي توانند پروتئين گلوتن را كه در گندم ، جو وچاودار وجود دارد تحمل كنند .گلوتن پروتئيني است كه باعث كش آمدن خمير وترد شدن بافت فرآورده نهايي مي گردد .گلوتن به دو خانواده پروتئيني گلوتنين ها وگليادين ها تقسيم مي شود .گليادين ها خود به سه نوع ساختاري ، و تقسيم مي شود .علم بيوتكنولوژي مدرن قادر است با دستكاري ژنتيكي در فرآيند توليد پروتئين هاي گلوتن ، مشكلات ناشي از پروتئين هاي حساسيت زا را حذف و يا به حداقل برساند .مطالعات متعددي در اين زمينه انجام گرفته است تا بتوان محصولاتي فاقد گلوتن يا با محتواي گلوتن بسيار كم توليد كرد .از روشهاي موثر پيش رو دراين خصوص ، فناوري RNAi است كه براي خاموشي يا كاهش بيان ژن به كارگرفته مي شود .تحقيق حاضر به عنوان گام موثر در جهت كاهش پروتئين گلوتن گندم جهت استفاده بيماران مبتلا به سلياك انجام گرفته است .بدين صورت كه ابتدا از طريق بانك هاي اطلاعاتي DNA ، توالي ژن -گليادين درگير درسنتز پروتئين هاي حساسيت زا مورد بررسي قرارگرفت و براي تكثير اختصاصي آن ، آغازگرهاي موردنياز با استفاده از نرم افزار پرايمر بلاست طراحي گرديد وبراي سنتز سفارش داده شد .به منظور تكثير قطعات ژني از دستگاه ترمال سايكلر استفاده شد .قطعات تكثيريافته با روش PCR پس از خالص سازي از ژل آگارز به وكتور pTG91 متصل وبعد از همسانه سازي توسط باكتريE.coli، توالي يابي گرديد و پس از اطمينان از صحت توالي همسانه سازي شده ، اقدام به همسانه سازي اين قطعات در يك وكتور به عنوان سازه RNAi گرديد .سازه مذكور شامل دو قطعه ژني -گليادين با دو طول متفاوت مي باشد كه به طور معكوس در داخل وكتور قرار گرفته و ساختارRNAi مورد نظر را ايجاد مي كنند .اين روش گام موثري در جهت توليد گياه گندم با محتواي كم پروتئين گلوتن مي باشد

فصل اول : بررسي منابع. فصل دوم : مواد و روش ها. فصل سوم : نتيجه و بحث

2931/11/10

8202پ

1

22033